Foutoplossing van algemene kwessies in roterende mikrotoom-snit

'n Roterende mikrotoom verander 'n paraffienblok in dun, eenvormige dele wat a mikroskoop eintlik kan openbaar. Wanneer snit verkeerd loop, is die fout selde die instrument alleen: dit is gewoonlik die ketting van fiksasie, verwerking, inbedding, lemversorging en masjienopstelling. Hierdie gids loop deur die mees algemene roterende mikrotoomprobleme, hoekom dit gebeur, en die regstellings wat skoon linte terug op die waterbad kry. Dit is geskryf vir histologie-, patologie- en onderriglaboratoriums wat herhaalbare resultate benodig sonder om te raai.

Seksiekwaliteit word voor die eerste sny bepaal

Die meeste snydefekte word tydens weefselvoorbereiding ingebak. As die blok onderverwerk, oorverwerk of swak georiënteerd is, sal geen mate van lemverstelling dit by die mikrotoom regmaak nie. Behandel die stappe hieronder as die eerste reël van probleemoplossing.

’n Goeie gewoonte is om die blok, mes en bad te bevestig voordat jy aan die voerwiel raak. Laboratoria wat hierdie roetine voor vlug standaardiseer, rapporteer baie minder verwoeste blokke, en die tyd wat spandeer word om na te gaan, betaal terug op elke afdeling wat nie hersien hoef te word nie.

• Fiksasie: weefsel moet lank genoeg en in die regte reagens vasgemaak word, anders bly dit sag en skeur.
• Verwerking: gegradeerde alkohole en skoonmaak moet ten volle dehidreer en infiltreer, of dele word saamgedruk en verkrummel.
• Inbedding: paraffien moet vry van borrels wees en die weefsel heeltemal omring, met die gesig georiënteerd vir die sny wat jy nodig het.
• Blok snoei: ontbloot 'n skoon, vierkantige gesig en verwyder verslete paraffien sodat die eerste gedeeltes nie besoedel is nie.

Probleem 1: dele skeur, krap of sleep

Geskeurde of geskeurde dele is die klassieke teken van 'n dowwe of vuil rand wat weerstandbiedende weefsel ontmoet. Die lem doen werk wat dit nie skoon kan doen nie, en die resultaat is 'n gedeelte wat langs vesels skeur of longitudinale skrape dra.

• Dowwe of gekapte mes: vorder na 'n vars lemsegment of vervang die lem; selfs 'n klein nick kry elke afdeling.
• Verkeerde vryloophoek: vergroot die klaringshoek effens sodat die rand die blokvlak sny eerder as om te krap.
• Harde of onderverwerkte weefsel: herverwerk of herinbed; kalsium- of beenagtige areas moet ontkalking word voordat dit gesny word.
• Puin op die rand: vee die mes af en blok gesig; wasskaafsels wat op die rand gelaat word, sleep en skeur die lint.

Probleem 2: dele plooi, vou of druk saam

Gerimpelde en gevoude dele beteken gewoonlik dat die lint nie ontspan nie, aangesien dit die lem verlaat. Die paraffien is te warm, die waterbad is te warm, of die gedeelte is dikker as wat die blok skoon kan vrylaat. Kompressie wys ook wanneer die meshoek te steil is.

• Waterbad te warm: verlaag dit tot net bokant die paraffiensmeltpunt (dikwels 40 tot 45 C) sodat dele plat raak sonder om te smelt.
• Deel te dik vir die weefsel: verminder dikte 'n stap; baie sagte blokke word saamgepers by groter instellings.
• Vryhoek te klein: maak die hoek 'n bietjie oop sodat die gedeelte weglig in plaas daarvan om te rol.
• Blok te warm: laat die blok afkoel, of sny in 'n koeler kamer; warm paraffien vou sodra dit vrygestel word.

Probleem 3: dikte verskil tussen snitte

Wanneer een gedeelte 4 mikrometer is en die volgende is 6, beweeg die instrument of die blok tussen hale. Veranderlike dikte ruïneer morfometrie en vlekke oneweredig, dus moet dit by die bron vasgemaak word eerder as geïgnoreer word.

• Los monsterklem: trek die boorkop vas en kyk of die blok vierkantig sit; enige toneelstuk verander die effektiewe voer.
• Verslete voermeganisme: verifieer die gekalibreerde voer en laat dit versien as die gerapporteerde instelling van die snit afwyk.
• Inkonsekwente handwielkrag: draai die wiel glad en volledig; gedeeltelike of rukkerige houe slaan die voorskot oor.
• Vibrasie of 'n onstabiele bank: plaas die mikrotoom op 'n soliede oppervlak en isoleer dit van naburige shakers of sentrifuges.

Probleem 4: kletsmerke en ongelyke lint

Gesels lyk soos fyn horisontale bande oor die gedeelte. Dit is 'n resonansie- of stabiliteitsprobleem: die blok, lem of hele instrument vibreer soos die rand deurgaan. Omdat dit meganies is, gaan die oplossing byna altyd oor stabiliteit en skerpte, nie dikte nie.

• Blok nie stewig ondersteun nie: gespan of herklem sodat die weefsel geen vrye gesig het wat tydens die sny kan buig nie.
• Los meshouer: trek die lemhouer en rugplaat vas; 'n verskuiwing rand skyfies en chatters.
• Dowwe rand: beweeg na 'n vars segment; 'n dowwe rand vibreer deur harde weefsel.
• Sny te vinnig: vertraag die beroerte en hou druk gelyk; gejaag prikkel gesels.

Probleem 5: geen gedeeltes nie, of gedeeltes kleef aan die lem

Soms draai die wiel en niks kom van die blok af nie, of dele klou aan die mes in plaas daarvan om 'n lint te vorm. Dit is gewoonlik 'n opstelling- of omgewingskwessie eerder as 'n stukkende masjien, en dit is vinnig om op te los sodra jy die gewone verdagtes ken.

• Voer nie betrokke nie: bevestig dat die dikteskakelaar gestel is en die voorskot vrygestel word; 'n nul- of geslote voer sny lug.
• Anti-rol plaat verkeerd gestel: verstel of terugtrek; 'n bord wat op die rand sit, keer dat die gedeelte oplig.
• Statiese of droë toestande: verhoog humiditeit effens of gebruik 'n anti-statiese stap sodat dele van die lem loslaat.
• Lem te hoog of laag: sit die mes weer sodat die snyrand die blokvlak op die regte hoogte ontmoet.

'n Voorafsnitlys wat jy kan herhaal

'n Kort, herhaalbare voorvlug voorkom die meeste van die probleme hierbo. Begin dit elke sessie op dieselfde manier, sodat die oplos van probleme voorkoming word.

• Inspekteer: kontroleer die blokvlak, lemsegment en klemme voor die eerste sny.
• Stel: bevestig dikte, klaringshoek en waterbadtemperatuur.
• Toets: sny een gedeelte en bekyk dit onder a mikroskoop voordat die bondel uitgevoer word.
• Rekord: let op die instellings per blok sodat 'n goeie resultaat herhaalbaar is.
• Skoon: vee die lem en bad af, en bêre lemme veilig in a bioveiligheid kabinet gebied.

Die instrument wat by die roetine pas

'n Betroubare mikrotoom verwyder raaiwerk van die snit self, wat jou laat fokus op voorbereiding en interpretasie. Vir spanne wat hardeware vergelyk, koppel die mikrotoom met 'n gekalibreerde analitiese balans en 'n bestendige sentrifugeer bank hou die hele histologie werkvloei konsekwent.

⭐ Aanbevole roterende mikrotoom | Wincom MCT-202

Wincom MCT-202

Wincom se Rotary Microtome MCT-202 is geposisioneer vir histologie-, patologie- en navorsingslaboratoriums wat paraffien-ingebedde weefselafdelings voorberei, met 'n snitdikte-instellingsreeks van 1 tot 25 mikrometer, 'n minimum instelling van 1 mikrometer, 'n maksimum monstergrootte van 40 by 30 millimeter binne plus of 'n minus-fout 5 persent. ’n Handdraaiende handwiel gee die operateur fyn, herhaalbare beheer oor elke snit, terwyl die stewige konstruksie dele konsekwent oor ’n volle blok hou. Dit maak dit geskik vir die onderrig van laboratoriums, diagnostiese histologie en roetine-patologie-werkvloeie wat betroubare, lae-variansie-afdelings benodig sonder 'n steil leerkurwe.

Kyk na die Wincom MCT-202 roterende mikrotoom

Ondersteunende toerusting wat seksiekwaliteit beskerm

Seksie vind nie in isolasie plaas nie. Die instrumente rondom die mikrotoom besluit of 'n goeie snit 'n goeie skyfie word, so hulle verdien dieselfde aandag as die masjien self.

• Bekyk: a mikroskoop by die bank om elke eerste gedeelte voor die hardloop na te gaan.
• Vlak: a waterbad stel net bokant paraffiensmelt om lintjies te ontspan.
• Montering: mikroskoopskyfies en dekglas pas by jou kleurroetine.
• Verwerking: an broeikas of oond en outoklaaf vir inbedding en skoon, herbruikbare laboratoriumware.
• Leer: ons blog en gidse soos die rol van mikroskope in diagnostiek en vyf mikroskooptipes om te weet.

Gereelde vrae